печать

№372 ФЕМОФЛОР-17+КВМ*, соскоб эпителиальных клеток урогенитального тракта

Внимание! Стоимость исследования указана для одной локализации 

Комплексная количественная оценка микробиоценоза урогенитального тракта путем сравнения содержания конкретных представителей нормо– и условно-патогенной биоты с общей бактериальной массой (ОБМ) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени». 

Выявляемые показатели: 
  • КВМ (контроль взятия материала), ОБМ (общая бактериальная масса), микоплазмы (Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp.), дрожжеподобные грибы (Candida spp.) – абсолютные значения; 
  • нормофлора (Lactobacillus spp.), факультативно-анаэробные (Enterobacterium spp., Streptococcus spp., Staphylococcus spp.), облигатно-анаэробные микроорганизмы (Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/Porphyromonas spp., Eubacterium spp., Sneathia spp./Leptotrichia spp./Fusobacterium spp., Megasphaera spp./Veillonella spp./Dialister spp., Lachnobacterium spp./Clostridium spp., Mobiluncus spp./Corinebacterium spp., Peptostreptococcus spp., Atopobium vaginae) – относительные количества генетически родственных групп микроорганизмов в ОБМ;
  • идентификация патогенов (Mycoplasma genitalium).
Под «spp.» подразумевается широкая группа микроорганизмов, значимая для диагностики дисбиоза.

 
Микробиоценоз влагалища женщин репродуктивного возраста - хорошо сбалансированная и устойчивая система. В норме в этом биотопе существуют микроорганизмы, способные выжить, сосуществовать и развиваться в конкретной физической среде, не вызывая заболевания макроорганизма.

Доминирующими агентами в микробиоценозе являются лактобактерии, продуктом жизнедеятельности которых является a-оксипропионовая молочная кислота, которая создаёт кислую реакцию влагалищного содержимого. Кроме кислой среды размножению патогенных микроорганизмов препятствуют образующаяся в результате жизнедеятельности лактобацилл перекись водорода, лизоцим и другие гликолитические ферменты. Помимо лактобактерий, в урогенитальном тракте здоровой женщины репродуктивного возраста может обнаруживаться более ста видов различных бактериальных микроорганизмов, грибов, вирусов и простейших.

Возникновение нарушений количественно-качественных взаимоотношений резидентных микроорганизмов - сапрофитных и условно-патогенных, населяющих мочеполовую систему в норме, приводит к возникновению дисбаланса. Развитие дисбаланса микробиоценоза может сопровождаться метаболическими, иммунными нарушениями и в ряде случаев клиническими проявлениями, степень выраженности которых варьируется от бессимптомного носительства до выраженной клинической манифестации.

В связи с вышеизложенным, такие нозологии как бактериальный вагиноз, урогенитальный кандидоз, заболевания, ассоциированные с микоплазмой, могут рассматриваться как частные случаи проявления дисбаланса микробиоценоза.

В настоящее время для установления диагноза используют традиционные методы клинической и лабораторной диагностики. Этиологически значимые инфекционные агенты выявляются с помощью методов лабораторного исследования: микроскопии нативных и окрашенных метиленовым синим и по Граму препаратов, культурального исследования (5% кровяной агар, среда Эндо, жидкие и твёрдые среды Сабуро), ПЦР-диагностики.

Стандартные методы лабораторной диагностики урогенитальных инфекций имеют ряд объективных ограничений; качество выполнения исследований во многом определяется профессиональной квалификацией врача клинической лабораторной диагностики.

Микроскопия мазков, окрашенных по Граму, позволяет определить:
  1. количество и морфотинкториальные характеристики эпителиоцитов;
  2. количество лейкоцитов, наличие фагоцитоза;
  3. морфотипы микроорганизмов (10 морфотипов);
  4. относительную количественную характеристику общего числа микроорганизмов в исследуемом препарате.
Объективные ограничения светооптической микроскопии позволяют идентифицировать только 10 морфотипов: Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Bacteroides spp., Mobiluncus spp., Fusobacterium spp., Leptotrihia spp., Veillonella spp., Candida spp., грамположительные кокки, колиформные палочки, при этом многие виды этиологически значимых облигатных и условно-патогенных возбудителей выявить невозможно. Кроме того, микроскопия даёт приблизительную количественную оценку биоценоза, что особенно существенно в определении этиологического значения выявленных условно-патогенных микроорганизмов в развитии воспалительного процесса у конкретной пациентки. Существенными недостатками также являются субъективизм и зависимость результата исследования от профессиональной квалификации врача клинической лабораторной диагностики.

Классическая микробиология до настоящего времени является «золотым стандартом» лабораторной диагностики, поскольку позволяет выполнить количественную характеристику, идентифицировать микроорганизм до вида и определить чувствительность выделенного штамма к лекарственным препаратам. Однако и этот метод не лишён ряда недостатков. Условно-патогенные микроорганизмы, главным образом, представлены анаэробными и факультативно-анаэробными микроорганизмами, для культивирования которых требуются высококачественные селективные питательные среды, специализированные лаборатории, оснащённые необходимым лабораторным оборудованием для выращивания анаэробов, специальная подготовка медицинского персонала лаборатории и высокий профессионализм исследователей. Неизбежно снижение эффективности метода в связи с объективными и субъективными погрешностями. Недостатком метода являются также длительные сроки культивирования (в среднем 7 дней) и необходимость сохранения жизнеспособности микроорганизмов до момента поступления биоматериала в лабораторию. Кроме того, ряд этиологически значимых микроорганизмов относятся к труднокультивируемым, что не позволяет основывать верификацию диагноза на результатах культурального исследования.

Метод ПЦР с детекцией результата по окончании реакции без количественного определения инфекционного возбудителя позволяет быстро и эффективно выявить искомый патогенный или условно-патогенный микроорганизм, минуя стадию культивирования и выделения чистых культур. Однако выявление условно-патогенных микроорганизмов без учёта количества конкретного микроорганизма и количественно-качественного состава исследуемого биотопа в целом, не позволяет определить этиологическое значение выявленных условно-патогенных микроорганизмов в развитии инфекционно-воспалительного процесса у конкретного пациента.

Решением проблемы количественной оценки широкого спектра условно-патогенных микроорганизмов является новый способ диагностики (патент на изобретение № 2362808 от 13.02.2008 г. «Способ диагностики дисбаланса микробиоты различных биотопов человека и степени его выраженности»), основанный на использовании метода ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени (RT-PCR). С его помощью стало возможным количественное обнаружение клинически значимых трудно- и некультивируемых условно-патогенных микроорганизмов - грамположительных бактерий (Atopobium vaginae), облигатно-анаэробных грамотрицательных бактерий (Prevotella, Veilonella spp, Porphyromonas spp, Fusobacterium spp, Eubacterium spp, Sneathia, Leptotrichia, Megasphaera, Dialister, Lachnobacterium)‏.

В основу способа положена комплексная количественная оценка микробиоценоза урогенитального тракта путем сравнения содержания конкретных представителей нормо– и условно-патогенной биоты с общей бактериальной массой (ОБМ):
  • сравнение количества лактобактерий с ОБМ даёт возможность оценить выраженность нарушений нормофлоры;
  • соотношение количеств условных патогенов в ОБМ позволяет определять значимость тех или иных микроорганизмов в развитии дисбаланса и степень его выраженности;
  • качество взятия соскоба и адекватность результата исследования оценивается с помощью специального параметра – контроля взятия материала (КВМ). КВМ представляет собой количество геномной ДНК человека в биоматериале, источником которой являются эпителиальные клетки, попадающие в пробу при правильной технике взятия биоматериала;
  • результаты количественных исследований методом RT-PCR не только дают возможность врачу определять объём необходимого вмешательства, но и позволяют выбрать точную направленность терапии;
  • впервые можно оценить эффективность лечения и то, насколько удалось восстановить нормальный баланс биоценоза. В ходе исследования за короткий промежуток времени из одной биопробы выполняется количественная оценка КВМ, ОБМ (степень обсеменённости), нормофлоры, факультативно-анаэробных и облигатно-анаэробных микроорганизмов, дрожжеподобных грибов, патогенов.
Материал для исследований. Для исследования женщин в репродуктивном возрасте используют соскобы эпителиальных клеток из влагалища (заднебоковые своды). Соскобы из уретры и цервикального канала могут быть исследованы по решению врача; в этих случаях трактовка результатов отличается.

Особенности взятия материала из влагалища: материал должен быть взят ДО проведения мануального исследования. Соскоб берут с верхнего бокового или верхнего заднего свода влагалища. У девочек взятие материала производят со слизистой оболочки преддверия влагалища, а в отдельных случаях - из заднего свода влагалища через гименальные кольца.

Особенности взятия материала из уретры: перед взятием биоматериала пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов; непосредственно перед взятием биоматериала наружное отверстие уретры необходимо обработать тампоном (который можно смочить стерильным физиологическим раствором); при наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать через 15-20 минут после мочеиспускания, при отсутствии выделений необходимо провести массаж уретры с помощью зонда для взятия биоматериала; в уретру у женщин зонд вводится на глубину 1-1,5 см, у детей материал для исследования берут только с наружного отверстия уретры.

Особенности взятия материала из цервикального канала: перед взятием материала необходимо УДАЛИТЬ ватным тампоном СЛИЗЬ и затем обработать шейку матки стерильным физиологическим раствором; зонд вводится в цервикальный канал на глубину 0,5-1,5 см; при извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание стенок влагалища.

Порядок взятия материала в пробирку с транспортной средой. Открыть крышку пробирки. С помощью одноразового зонда сделать соскоб эпителиальных клеток. Перенести зонд с биоматериалом в пробирку с транспортной средой, зонд тщательно прополоскать в транспортной среде, затем извлечь и выбросить (при необходимости взятия биоматериала из нескольких биотопов, повторить процедуру, каждый раз забирая материал новым зондом в новую пробирку). Исключить попадание гноя или слизи в пробирку. Пробирку плотно закрыть крышкой и промаркировать.

Транспортировка и хранение исследуемого материала. ВНИМАНИЕ! Время от взятия материала до начала исследования не должно превышать 24 часов. Транспортировать и хранить образцы до начала исследования при +2...+8°С. В случае невозможности доставки материала в лабораторию в течение 24 часов допускается однократное замораживание материала на срок до 1 месяца.

Обратите внимание на учебное пособие для врачей! Урогенитальные инфекции, обусловленные условно-патогенной биотой, у женщин.

* КВМ - Контроль взятия материала

Литература

  • Болдырева М.Н., Липова Е.В., Алексеев Л.П., Витвицкая Ю.Г., Гуськова И. А. Характеристика биоты урогенитального тракта у женщин репродуктивного возраста методом ПЦР в режиме реального времени. Журнал акушерства и женских болезней, 2009, том LVIII, выпуск 6, стр 36-42.
  • Плотко Е.Э., Ворошилина Е.С., Хаютин Л.В., Абакумова Е.И., Тумбинская Л.В., Донников А.Е. Репродуктивное поведение женщины и состояние биоценоза влагалища. Уральский медицинский журнал, №10(64), 2009г., стр.150-154.
  • Шипицына Е.В., Мартикайнен З.М., Воробьева Н.Е., Ермошкина М.С., Степанова О.С., Донников А.Е.,Скоркина Ю.А., Тумбинская Л.В., Савичева А.М. Применение теста Фемофлор для оценки микробиоценоза влагалища. Журнал акушерства и женских болезней, №3, 2009г., стр.38-44.
  • Robert P. Nugent et al. Reliability of diagnosing bacterial vaginosis is improved by a standardized method of Gram stain interpretation // Journal of clinical microbiology, Feb. 1991, p. 297-301.
  • Уварова Е.В. and Султанова Ф.Ш., Влагалище как микроэкосистема в норме и при воспалительных процессах гениталий различной этиологии (обзор литературы). Гинекология, 2002. 4(4): p. 189–195.
  • Сухих Г.Т., Прилепская В.Н., Трофимов Д.Ю., Донников А.Е., Айламазян Э.К., Савичева А.М., Шипицына Е.В. Применение метода полимеразной цепной реакции в реальном времени для оценки микробиоценоза урогенитального тракта у женщин (тест Фемофлор). Москва, 2011.
Загружаю корзину...
ЦЕНА 2 600 руб

+ Взятие мазка/соскоба:  399 руб
Срок исполнения
(указанный срок не включает день взятия биоматериала)
до 4 рабочих дней
Исследуемый материал
Соскоб эпителиальных клеток урогенитального тракта (вагинальный, цервикальный, уретральный)
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».
Примеры результатов на бланке*:
Скачать пример

*Обращаем Ваше внимание на то, что при заказе нескольких исследований, на одном бланке могут быть отражены несколько результатов исследований.