специальной подготовки не требуется.
Форма выдачи результата:
количественный анализ.
Примеры результатов
Кариотип: nuc ish (BCL2x2)(5’BCL2 sep 3’BCL2x1)[8/200].
(5’BCL2x2,3’BCL2x3)(5’BCL2 con 3’BCL2x1)[14/200]
| Используемая FISH-проба | Аберрация | % (кол-во) интерфазных ядер с аберрацией | Общее кол-во ядер |
| XT BCL2 Break Apart Probe (MetaSystems) | Перестройка локуса гена BCL2/18q21 | 11 (22) | 200 |
Заключение: перестройка локуса гена BCL2/18q21 выявлена в 11% проанализированных интерфазных ядер.
Кариотип: nuc ish (BCL2x2)[200].
| Используемая FISH-проба | Аберрация | % (кол-во) интерфазных ядер с аберрацией | Общее кол-во ядер |
| XT BCL2 Break Apart Probe (MetaSystems) | Перестройка локуса гена BCL2/18q21 | 0 | 200 |
Заключение: перестройка локуса гена BCL2/18q21 в проанализированных интерфазных ядрах не выявлена.
Метод определения
FISH-исследование интерфазных ядер опухолевого материала
Исследуемый материал
Опухолевая ткань, прошедшая предварительную гистологическую обработку и заключенная в парафин.
Фолликулярные лимфомы (ФЛ) – группа индолентных неходжкинких опухолей из В-клеток в лимфоузлах, селезенке, костном мозге, печени и других экстранодальных областях. ФЛ составляют 20% всех лимфопролиферативных заболеваний взрослых. Медиана возраста пациентов около 60 лет, соотношение мужчины: женщины примерно 1:1,7. Чаще всего опухоль поражает периферические лимфоузлы, селезенку, миндалины, костный мозг, вальдейерово кольцо. Из экстранодальных поражений частая локализация – желудочно-кишечный тракт и мягкие ткани кожи. У части пациентов ФЛ длительное время протекает бессимптомно и на протяжении многих лет не требует терапии. Клиническая картина заболевания характеризуется медленным темпом прогрессирования и хорошим ответом на лечение.
Ключевым онкогенным событием является транслокация с вовлечением гена BCL2, находящегося на длинном плече 18-й хромосомы. В результате транслокации происходит перемещение BCL2 гена с 18-й хромосомы на хромосому 14 (Н-цепи иммуноглобулина) или 2, 22 (L-цепи иммуноглобулина) (t(14;18)(q32;q21), t(2;18)(p11;q21), t(18;22)(q21;q11)). Это приводит к гиперэкспрессии белка BCL2, который имеет антиапоптозные свойства, и блоку апоптоза, благодаря чему опухолевые клетки неконтролируемо делятся и могут приобретать дополнительные хромосомные аберрации.
Одним из молекулярных методов диагностики ФЛ, позволяющим прицельно исследовать очаг поражения на наличие перестройки локуса гена BCL2/8q21, является флуоресцентная in situ гибридизация (Fluorescence In Situ Hibridization, FISH), выполняемая на гистологических срезах с парафинового блока опухоли (гистоFISH). Метод дает возможность выявить присутствие и точную локализацию определенной, заранее известной последовательности ДНК. Оценка связывания ДНК-пробы с хромосомным участком происходит в флуоресцентном микроскопе. Интерпретация результатов FISH-исследований производится в соответствии с Международной номенклатурой (International System for Cytogenetic Nomenclature, ISCN, 2015).
Методы генетической диагностики онкогематологических заболеванийЛитература
- Salles G., Ghesquieres H. Current and future management of follicular lymphoma. International journal of hematology. 2012; 96:544-551;
- Карселадзе А.И. Архив патологии. Реакция флуоресцентной in situ гибридизации (FISH-реакция) в диагностике онкологических заболеваний. - М.: Изд. «Медицина». 2009:40.
- Клинические рекомендации по диагностике и лечению фолликулярной лимфомы. Коллектив авторов под руководством акад. В.Г. Савченко, проф. И.В. Поддубной. 2014.
- Тумян Г.С., Леонтьева А.А., Фалалеева Н.А., Тупицына Д.Н., Зейналова П.А., Чекан А.А., Быков Д.А., Кондратьева Т.Т., Коломейцев О.А., Ларионова В.Б., Османов Е.А. Фолликулярная лимфома: 10 лет терапии. Клиническая онкогематология. 2012;5(3):204-213.