Метод определения
Жидкостная цитология технология ThinPrep®.
Исследуемый материал
мазок эпителия слизистой шейки матки и цервикального канала
Жидкостная цитология ThinPrep® – стандарт проведения цитологического исследования биоматериала из шейки матки.
Рак шейки матки (РШМ) – второй по распространенности тип рака среди женского населения, от которого ежегодно умирает более 250 000 женщин во всем мире. По оценкам Всемирной организации здравоохранения, в течение 10 ближайших лет смертность от рака шейки матки может возрасти на 25%.
Процесс развития РШМ длительный. Период от интраэпителиального поражения клеток низкой степени (LSIL – low grade squamous intraepithelial lesion), интраэпителиального поражения клеток высокой степени (HSIL – high grade squamous intraepithelial lesion) до инвазивного рака шейки может составить 10-15 лет. Это означает, что у женщин достаточно времени для проведения соответствующих профилактических мероприятий, препятствующих развитию инвазивного РШМ.
Для выявления предраковых изменений, которые при отсутствии лечения могут привести к развитию рака, проводится цитологический скрининг рака шейки матки: тестирование всех женщин, у большинства из которых симптомы не проявляются (цитологическое исследование биоматериала шейки матки, окрашивание по Папаниколау, Рар-тест).
Жидкостная цитология – это стандартизированная технология приготовления цитологического препарата. Сегодня она признана наиболее информативным способом получения биологического материала и рекомендована в качестве «золотого стандарта» диагностики интраэпителиальных неоплазий слизистой цервикального канала и влагалищной части шейки матки. Выдача результата осуществляется в соответствии с классификацией Bethesda.
Преимущества жидкостной цитологии
- Улучшенное качество материала:
a) в контейнер со стабилизирующим раствором попадает весь полученный эпителиально-клеточный материал;
б) минимизируется содержание слизи, форменных элементов крови, элементов воспаления, разрушенных клеток;
в) клетки сохраняют как морфологические, так и молекулярно-биологические свойства.
- Длительный срок хранения полученного биоматериала: материал хранится в специальном стабилизирующем растворе PreservCyt, который предотвращает преждевременное высыхание клеток, что позволяет сохранить образец в оптимальных условиях для дальнейшей транспортировки в лабораторию.
- Быстрое приготовление цитологического препарата.
- Из полученного биологического материала можно приготовить несколько цитологических препаратов.
- Приготовление стандартизированного монослойного мазка.
- Стандартизированные методики окрашивания. Таким образом, по сравнению с традиционным методом приготовления мазка со слизистой шейки матки, применение новой технологии жидкостной цитологии позволяет значительно повысить качество цитологического мазка.
Главный недостаток цитологического исследования традиционного мазка из шейки матки – большая доля (до 20-40%) ложноотрицательных заключений. Ошибки цитологического метода более чем в 60% вызваны нарушениями процедур взятия и подготовки материала для исследования. Основными причинами неадекватности цитологического препарата, приготовленного традиционным способом, являются:
˗ недостаточное количество эпителиально-клеточного материала в мазке;
˗ неравномерное распределение биологического материала на стекле;
˗ большое содержание слизи;
˗ большое количество элементов воспаления, форменных элементов крови;
˗ высокая частота артефактов по причине высыхания препарата после взятия мазка (нарушение правил влажной фиксации);
˗ неполное прокрашивание клеточного материала из-за его многослойности (толстый мазок).
Технология жидкостной цитологии является стандартизированной технологией приготовления цитологического препарата. Использование технологии жидкостной цитологии позволяет снизить количество ложных результатов благодаря использованию стабилизирующего раствора, а также специального инструмента для взятия материала – щеточки Cervex-Brush (рис. 1).
Рис. 1. Пластиковая щетка-кисточка типа Cervex-Brush
Ограничения метода жидкостной цитологии В тонкослойных мазках, приготовленных методом ЖЦ, отсутствуют элементы фона, что улучшает качество препарата с точки зрения оценки клеток, но в то же время не всегда дает возможности оценить клеточное окружение с точки зрения воспалительного процесса (наличия лейкоцитов, микрофлоры и пр.).
Особенности технологии ThinPrep®:
- Консервирующая среда во флаконе для взятия образца выполнена на основе метанола: метанол обладает лучшими консервирующими свойствами и не приводит к деформации клеток.
- Технология вакуумной мембранной фильтрации позволяет:
˗ получать стандартизированные препараты высокого качества диаметром 2 см;
˗ эффективно проводить очистку препарата от слизи и эритроцитов;
˗ концентрировать диагностически значимые элементы на фильтре с последующим переносом на стекло;
˗ контролировать толщину клеточного слоя на фильтре и получать монослойный, информативный препарат стандартной клеточности вне зависимости от исходной клеточности образца;
˗ сохранять в препарате воспалительные элементы (лейкоциты, бактерии, грибы и пр.) для оценки общего состояния.
- Высокое качество препарата обеспечивает значительное увеличение выявляемости интраэпителиальных поражений (в два и более раз по сравнению с традиционным цитологическим исследованием).
- Содержимое флакона можно использовать для проведения дополнительных исследований: ПЦР-тесты на вирус папилломы человека и другие ИППП, иммуноцитохимические тесты и другие исследования (в том числе отсроченные, так как крышка флакона остается неповрежденной после обработки образца в процессоре).
- Методика ThinPrep позволяет работать как с гинекологическим, так и с негинекологическим материалом.
- Автоматическая сверка штрих-кода на флаконе с образцом и на стекле исключает возможность ошибки и обеспечивает прослеживаемость каждого образца.
- Большим преимуществом технологии ThinPrep® является максимальный уровень автоматизации исследования, что позволяет обеспечить стандартизацию и высокое качество результата.
Литература
- American Cancer Society (ACS), American Society for Colposcopy and Cervical Pathology (ASCCP), and American Society for Clinical Pathology (ASCP). Cervical Cancer Screening Guidelines for Average-Risk Women. - Atlanta, GA 30329-4027 USA. 2012. http://www.cdc.gov/cancer/cervical/pdf/guidelines.pdf.
- Arbyn M., Anttila A. et al. European guidelines for quality assurance in cervical cancer screening (second edition). Luxembourg: Office for Official Publications of the European Communities. 2008:25.
- Ferenczy A., Coutlee F., Franco E., Hankins C. Human papillomavirus and HIV coinfection and the risk of neoplasias of the lower genital tract: a review of recent developments. Canadian Medical Association. 2003;169(5):431-434.
- Franco E.L., Duarte-Franco E., Ferenczy. Cervical cancer: epidemiology, prevention and the role of human papillomavirus infection. Canadian Medical Association. 2001;164(7):1017-1025.
- Shroyer K.R., Chivukula M. et al. CINtec® p16 Cervical Histology Compendium & Staining Atlas. Roche Diagnostics International Ltd. CH-6343 Rotkreuz. - Switzerland. 2012. http://www.roche.com/index.htm.
- Schwartz S.M., Daling J.R., Shera K.A. et al. Human Papillomavirus and prognosis of invasive cervical cancer: a