Микроскопическое (бактериоскопическое) исследование мазка, окрашенного по Граму (Gram Stain. Bacterioscopic examination of different smears)

A12.20.001.000.01 (Номенклатура МЗ РФ, Приказ №804н)

Синонимы: Анализ мазка, окрашенного по Граму.

Microscopic (bacterioscopic) examination of Gram-stained smear.

Материал для исследования:

• гинекологические мазки у женщин (материалом служат отделяемое наружных половых органов, уретры, влагалища, шейки матки, полости матки);
• у мужчин исследуют соскоб из уретры, сперму. Секрет предстательной железы (семенная жидкость), предварительно взятый лечащим врачом, доставляется в МО пациентом;
• материалом для мазков другой локализации могут служить мокрота, раневое отделяемое, гной, мазки из зева, уха, отделяемого глаза и др. Плевральная, перитонеальная, суставная и другие жидкости берутся лечащим врачом и доставляются в МО пациентом.

Краткое описание исследования Микроскопического исследования мазка, окрашенного по Граму

Бактериоскопия (от лат. «скопео» – смотрю) – это лабораторный метод исследования бактерий под микроскопом. Метод широко используется врачами разных специальностей при подозрении на инфекционный процесс и наличии гнойно-воспалительных проявлений заболевания, а также при диспансерных обследованиях в гинекологической и акушерской практике.

При микроскопии в мазках можно обнаружить:

• бактерии;
• грибы (при кандидозе);
• простейшие (при трихомониазе).

Важными моментами при проведении исследования являются оценка морфологии, т. е. формы бактерий, их размеров и расположения. Важными также являются количество (от скудного до массивного) и отношение к красителям (грамположительные и грамотрицательные клетки).

Нормальной флорой при исследовании гинекологических мазков являются грамположительные палочки, которые в результате описываются как лактоморфотипы. При бактериальном вагинозе микробная флора представлена обильной мелкой коккобациллярной грамвариабельной флорой и характеризуется снижением лактоморфотипов. При гонорее в мазке присутствуют грамотрицательные кокки бобовидной формы, расположенные парами внутри и внеклеточно. При других гнойно-воспалительных состояниях (неспецифических) могут встречаться грамположительные кокки, грамотрицательные палочки. В мазках учитываются также наличие эпителия, присутствие ключевых клеток и количество лейкоцитов.

В мокроте имеют значение грамположительные кокки, слегка вытянутые, в капсуле, расположенные парами, морфологически сходные с пневмококками, или мелкие неодинаковой формы грамотрицательные палочки, сходные с гемофилами, а также грамотрицательные кокки, расположенные поодиночке, что может говорить в пользу наличия бранхамелл.

В мазках из ран чаще всего встречаются грамположительные кокки.

Однако с помощью микроскопического исследования нет возможности дать заключение о названии бактерий. Для определения рода и вида бактерий требуется проведение бактериологического посева.

С какой целью выполняют Микроскопическое исследование мазка, окрашенного по Граму

Микроскопическое исследование окрашенного нативного мазка проводят при диагностике инфекционно-воспалительных заболеваний мочеполовых путей, легких, ЛОР-органов, глаз, кожи, мягких тканей и др. Возможно применение данного теста в качестве дополнительного исследования к посевам на анаэробную инфекцию.

Материал для исследования:

• гинекологические мазки у женщин (материалом служат отделяемое наружных половых органов, уретры, влагалища, шейки матки, полости матки);
• у мужчин исследуют соскоб из уретры, сперму, секрет предстательной железы (семенная жидкость);
• материалом для мазков другой локализации могут служить мокрота, плевральная, перитонеальная, суставная и др. жидкости, раневое отделяемое, гной, мазки из зева, уха, отделяемого глаза и др.

Что может повлиять на результат исследования Микроскопического исследования мазка, окрашенного по Граму

Не рекомендуется брать биологический материал для цитологического, бактериологического и ПЦР-исследований в один день!

Литература

1. Долгов В. В., Годков М.А., Вавилова Т.А. Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство //М.: ГЭОТАР-Медиа. – 2025. – С. 672.
2. Клинические рекомендации. Бактериальный вагиноз. МЗ РФ. – 2022.
3. Клинические рекомендации. Гонококковая инфекция. МЗ РФ. – 2024.
4. Клинические рекомендации. Урогенитальный трихомониаз. МЗ РФ. – 2024.
5. Синдром патологических выделений из половых путей женщины, клинический протокол, – 2024.
6. Анкирская А. С., Муравьева В. В. Интегральная оценка состояния микробиоты влагалища. Диагностика оппортунистических вагинитов //Акушерство и гинекология: Новости. Мнения. Обучения. – 2020. – Т. 8. – №. 1 (27). – С. 69-76.
7. Зубков М. Н., Гугуцидзе Е. Н. Микробиологические аспекты диагностики пневмоний //Пульмонология. – 2021. – №. 1. – С. 41-45.
8. Пилецкая У. В. и др. Современные методы лечения бактериального вагиноза у женщин репродуктивного возраста //Journal of Siberian Medical Sciences. – 2019. – №. 4. – С. 4-11.
9. Zinserling V. Microbiology and Molecular Biology in Diagnostics //Infectious Lesions of the Central Nervous System. – Springer, Cham, 2022. – С. 1-4.

Правила подготовки к проведению Микроскопического исследования мазка, окрашенного по Граму

В каких случаях проводят анализ «Микроскопическое исследование мазка, окрашенного по Граму»:

• скрининговое обследование при диагностике различных гнойно-воспалительных заболеваний мочеполовых путей, легких, ЛОР-органов, глаз (при подозрении на гонококковую инфекцию), кожи, мягких тканей и др.;
• обследование беременных женщин;
• обследование по показаниям при профосмотрах;
• диагностика бактериального вагиноза;
• дополнительное исследование к посевам на анаэробную инфекцию.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Форма предоставления результатов

Результат содержит информацию о:

• наличии и виде эпителиальных клеток, присутствующих в мазке;
• наличии клеточного детрита и слизи;
• количестве лейкоцитов в одном поле зрения;
• наличии определенных морфологических типов (морфотипов) бактерий и элементов грибов, их тинкториальных свойствах (при окраске по Граму), а также их относительном количестве.

Интерпретация результатов исследования Микроскопического исследования мазка, окрашенного по Граму

Ограничение метода

При исследовании биологических жидкостей (семенной, плевральной, перитонеальной, эякулята и др.) основной целью исследования является выявление бактерий. Из-за того, что в большинстве случаев данные виды материала бедны по клеточному составу, мазки на стекле плохо держатся и фиксируются, в процессе окраски возможна потеря части мазка, что приводит к малой информативности описания клеточного состава.

ВНИМАНИЕ! Данный вид микроскопического исследования не заменяет общеклинический анализ, основной целью которого является микроскопическое исследование клеточного состава, проводимое строго в жидком (нативном) материале.

При просмотре мазка обращается внимание на:

• наличие и вид эпителиальных клеток, присутствующих в мазке;
• наличие клеточного детрита и слизи;
• количество лейкоцитов, определяемых в одном поле зрения;
• наличие определенных морфологических типов (морфотипов) бактерий и элементов грибов, их отношение к красителям (при окраске по Граму), а также на их относительное количество.

Типы бактерий, которые могут встретиться в мазках:

• грамположительные и грамотрицательные кокки, расположенные вне- и внутриклеточно, парами, группами, цепочками;
• грамотрицательные колиформные бактерии;
• лактоморфотипы (тип лактобактерий);
• морфотипы дифтероидов или коринебактерий;
• морфотипы строгих анаэробных бактерий (мобилункус, пептострептококки, фузобактерии, бактероиды).

Интерпретация микроскопической картины мазков

Оценивается общее количество материала на стекле.

оценивается состояние эпителия, присутствие ключевых клеток. Количество эпителиальных клеток не учитывается, т. к. не имеет диагностической значимости (справедливо для гинекологических мазков).

Оценка лейкоцитарной реакции:

• лейкоциты отсутствуют, ед. в п/зр.;
• до 10 в п/зр. – небольшое количество;
• 10-15 в п/зр. – умеренное количество;
• 30-50 в п/зр. и более – большое количество;
• умеренное и большое количество оцениваются как этиологически значимые для воспалительной реакции.

Количественная оценка микрофлоры:

• + или до 10 в п/зр. незначительное/скудное количество;
• ++ или 11-100 в п/зр. умеренное количество;
• +++ или 100-1000 в п/зр. большое количество/значительное;
• ++++ или более 1000 в п/зр. массивное количество.

Посев рекомендован:

• в случае умеренной и большой лейкоцитарной реакции при отсутствии в мазке микробов (т. к. микроскопический метод имеет нижний предел выявляемости > 10^5 КОЕ/мл, а патогенные потенции условно-патогенных микроорганизмов могут проявляться в небольшом количестве (на уровне 10^4-10^5 КОЕ/мл);
• в случае если морфотипы УПМ обнаруживаются при микроскопии даже как единичные в поле зрения для определения рода и вида микроорганизма, постановки чувствительности к антибиотикам и оценки количества для выявления этиологической значимости;
• для дифференцированной диагностики лактобацилл, клостридий, эубактерий, пропионобактерий и др., поскольку они представлены единым морфотипом;
• для определения вида грибов и определения их чувствительности к антимикотическим препаратам;
• в случае бактериального вагиноза, если он сочетается с неспецифическим воспалительным процессом, сопровождаемым умеренно выраженной лейкоцитарной реакцией.

Посев не рекомендован (или не обязателен):

• в случае бактериального вагиноза, если он не сочетается с УПМ;
• в случае цитолитического вагиноза;
• в случае промежуточной формы микроценоза;
• в случае вагинальной атрофии.