Исследование биоценоза урогенитального тракта. Фемофлор 16.

A26.20.032.000.01 (Номенклатура МЗ РФ, Приказ №804н)

Синонимы: Микробиоценоз, вагинальный дисбиоз.

DNA, Real-time PCR, RT-PCR, Femoflor-Screen, bacteriological markers of vaginal dysbiosis, vaginal microflora of women.

Краткое описание исследования «Исследование биоценоза урогенитального тракта. Фемофлор 16»

Фемофлор 16 – это исследование, позволяющее комплексно количественно оценить микробиоценоз урогенитального тракта путем сравнения содержания конкретных представителей нормо- и условно-патогенной биоты с общей бактериальной массой (ОБМ) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.

Выявляемые возбудители:

• КВМ (контроль взятия материала), общая бактериальная масса (ОБМ), микоплазмы (Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp.), дрожжеподобные грибы (Candida spp.) – абсолютные значения;
• нормофлора (Lactobacillus spp.), облигатно-анаэробные микроорганизмы Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/Porphyromonas spp.
• относительные количества генетически родственных групп микроорганизмов в ОБМ;
• идентификация патогенов (Mycoplasma genitalium).

Под «spp.» подразумевается широкая группа микроорганизмов, значимая для диагностики дисбиоза.

Микробиоценоз влагалища женщин репродуктивного возраста – это хорошо сбалансированная и устойчивая система. В норме в этом биотопе существуют микроорганизмы, способные выжить, сосуществовать и развиваться в конкретной физической среде, не вызывая заболевания макроорганизма. Доминирующими агентами в микробиоценозе являются лактобактерии, продуктом жизнедеятельности которых является α-оксипропионовая молочная кислота, которая создает кислую реакцию влагалищного содержимого. Кроме кислой среды размножению патогенных микроорганизмов препятствуют образующаяся в результате жизнедеятельности лактобацилл перекись водорода, лизоцим и другие гликолитические ферменты. Помимо лактобактерий, в урогенитальном тракте здоровой женщины репродуктивного возраста может обнаруживаться более ста видов различных бактериальных микроорганизмов, грибов, вирусов и простейших.

Что может повлиять на результаты анализа «Исследование биоценоза урогенитального тракта. Фемофлор 16»

Возникновение нарушений количественно-качественных взаимоотношений резидентных микроорганизмов – сапрофитных и условно-патогенных, населяющих мочеполовую систему в норме, приводит к возникновению дисбаланса. Развитие дисбаланса микробиоценоза может сопровождаться метаболическими, иммунными нарушениями и в ряде случаев клиническими проявлениями, степень выраженности которых варьирует от бессимптомного носительства до выраженной клинической манифестации. В связи с вышеизложенным, такие нозологии как бактериальный вагиноз, урогенитальный кандидоз, заболевания, ассоциированные с микоплазмой, могут рассматриваться как частные случаи проявления дисбаланса микробиоценоза. В настоящее время для установления диагноза используют традиционные методы клинической и лабораторной диагностики. Этиологически значимые инфекционные агенты выявляются с помощью методов лабораторного исследования:

• микроскопии нативных и окрашенных метиленовым синим и по Граму препаратов;
• культурального исследования (5% кровяной агар, среда Эндо, жидкие и твердые среды Сабуро);
• ПЦР-диагностики.

Стандартные методы лабораторной диагностики урогенитальных инфекций имеют ряд объективных ограничений; качество выполнения исследований во многом определяется профессиональной квалификацией врача клинической лабораторной диагностики.

Микроскопия мазков, окрашенных по Граму, позволяет определить:

1. количество и морфотинкториальные характеристики эпителиоцитов;
2. количество лейкоцитов, наличие фагоцитоза;
3. морфотипы микроорганизмов (10 морфотипов);
4. относительную количественную характеристику общего числа микроорганизмов в исследуемом препарате.

Объективные ограничения светооптической микроскопии позволяют идентифицировать только 10 морфотипов: Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Bacteroides spp., Mobiluncus spp., Fusobacterium spp., Leptotrihia spp., Veillonella spp., Candida spp., грамположительные кокки, колиформные палочки, при этом многие виды этиологически значимых облигатных и условно-патогенных возбудителей выявить невозможно. Кроме того, микроскопия дает приблизительную количественную оценку биоценоза, что особенно существенно в определении этиологического значения выявленных условно-патогенных микроорганизмов в развитии воспалительного процесса у конкретной пациентки.

Существенными недостатками также являются субъективизм и зависимость результата исследования от профессиональной квалификации врача клинической лабораторной диагностики.

Классическая микробиология до настоящего времени является «золотым стандартом» лабораторной диагностики, поскольку позволяет выполнить количественную характеристику, идентифицировать микроорганизм до вида и определить чувствительность выделенного штамма к лекарственным препаратам. Однако и этот метод не лишен ряда недостатков. Условно-патогенные микроорганизмы, главным образом, представлены анаэробными и факультативно-анаэробными микроорганизмами, для культивирования которых требуются высококачественные селективные питательные среды, специализированные лаборатории, оснащенные необходимым лабораторным оборудованием для выращивания анаэробов, специальная подготовка медицинского персонала лаборатории и высокий профессионализм исследователей. Неизбежно снижение эффективности метода в связи с объективными и субъективными погрешностями. Недостатком метода являются также длительные сроки культивирования (в среднем 7 дней) и необходимость сохранения жизнеспособности микроорганизмов до момента поступления биоматериала в лабораторию. Кроме того, ряд этиологически значимых микроорганизмов относятся к труднокультивируемым, что не позволяет основывать верификацию диагноза на результатах культурального исследования.

Метод ПЦР с детекцией результата по окончании реакции без количественного определения инфекционного возбудителя позволяет быстро и эффективно выявить искомый патогенный или условно-патогенный микроорганизм, минуя стадию культивирования и выделения чистых культур. Однако выявление условно-патогенных микроорганизмов без учета количества конкретного микроорганизма и количественно-качественного состава исследуемого биотопа в целом, не позволяет определить этиологическое значение выявленных условно-патогенных микроорганизмов в развитии инфекционно-воспалительного процесса у конкретного пациента. Решением проблемы количественной оценки широкого спектра условно-патогенных микроорганизмов является способ диагностики, основанный на использовании метода ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени (RT-PCR). С его помощью стало возможным количественное обнаружение клинически значимых трудно- и некультивируемых условно-патогенных микроорганизмов – грамположительных бактерий (Atopobium vaginae), облигатно-анаэробных грамотрицательных бактерий (Prevotella spp., Veilonella spp., Porphyromonas spp., Fusobacterium spp, Eubacterium spp, Sneathia spp., Leptotrichia spp., Megasphaera spp., Dialister spp., Lachnobacterium spp.)‏.

В основу способа положена комплексная количественная оценка микробиоценоза урогенитального тракта путем сравнения содержания конкретных представителей нормо- и условно-патогенной биоты с общей бактериальной массой (ОБМ):

• сравнение количества лактобактерий с ОБМ дает возможность оценить выраженность нарушений нормофлоры;
• соотношение количеств условных патогенов в ОБМ позволяет определять значимость тех или иных микроорганизмов в развитии дисбаланса и степень его выраженности;
• качество взятого соскоба и адекватность результата исследования оценивается с помощью специального параметра – контроля взятия материала (КВМ). КВМ представляет собой количество геномной ДНК человека в биоматериале, источником которой являются эпителиальные клетки, попадающие в пробу при правильной технике взятия биоматериала;
• результаты количественных исследований методом RT-PCR не только дают возможность врачу определять объем необходимого вмешательства, но и позволяют выбрать точную направленность терапии;
• впервые можно оценить эффективность лечения и то, насколько удалось восстановить нормальный баланс биоценоза. В ходе исследования за короткий промежуток времени из одной биопробы выполняется количественная оценка КВМ, ОБМ (степень обсемененности), нормофлоры, безусловных патогенов и условно-патогенных микроорганизмов.

Аналитические показатели

Аналитическая чувствительность исследования для всех, кроме Mycoplasma genitalium – 10000 копий ДНК/мл. Для Mycoplasma genitalium – 2000 копий/мл.

Обратите внимание на учебное пособие для врачей! Урогенитальные инфекции, обусловленные условно-патогенной биотой, у женщин репродуктивного возраста.

С какой целью проводят «Исследование биоценоза урогенитального тракта. Фемофлор 16»

Комплексная количественная оценка микробиоценоза урогенитального тракта путем сравнения содержания конкретных представителей нормо- и условно-патогенной биоты с общей бактериальной массой (ОБМ). Исследование предназначено для детальной оценки микробиоценоза влагалища, может быть рекомендовано для проведения комплексного клинического обследования и мониторинга эффективности проведенного лечения.

Литература

1. ВОЗ. Информационные бюллетени. Инфекции, передаваемые половым путем (ИППП). – 2025.
2. Долгов В. В., Годков М.А., Вавилова Т.А. Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство //М.: ГЭОТАР-Медиа. – 2025. – С. 672.
3. Клинические рекомендации. Бактериальный вагиноз. – 2022.
4. Клинические рекомендации. Гонококковая инфекция. – 2024.
5. Клинические рекомендации. Урогенитальные заболевания, вызванные Mycoplasma genitalium. – 2024.
6. Клинические рекомендации. Урогенитальный трихомониаз. МЗ РФ. – 2024.
7. Клинические рекомендации. Хламидийная инфекция. – 2024.
8. Синдром патологических выделений из половых путей женщины, клинический протокол / [Коллектив авторов]. — М.: Редакция журнала StatusPraesens, 2024. — 112 с.
9. Zinserling V. Microbiology and Molecular Biology in Diagnostics //Infectious Lesions of the Central Nervous System. – Springer, Cham, 2022. – С. 1-4.

Правила подготовки к анализу «Исследование биоценоза урогенитального тракта. Фемофлор 16»

Обсемененность и видовой состав исследуемого биотопа урогенитального тракта женщины зависит от фазы менструального цикла. Обследование женщин целесообразно проводить в первую половину менструального цикла, не ранее 5-го дня. Допустимо обследование во второй половине цикла, не позднее, чем за 5 дней до предполагаемого начала менструации. При наличии выраженных симптомов воспаления, взятие материала проводится в день обращения. Накануне и в день обследования пациентке не рекомендуется выполнять спринцевание влагалища. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии (общей/местной), применения пробиотиков и эубиотиков, ранее 24-48 часов после полового контакта, интравагинального УЗИ и кольпоскопии. Рекомендуется брать материал не ранее, чем через 14 дней после применения антибактериальных препаратов и местных антисептиков, и не ранее, чем через 1 месяц после применения антибиотиков перорально. Если для исследования берут соскоб из уретры, сбор материала проводят до или не ранее 2-3 часов после мочеиспускания.

Обратите внимание на учебное пособие для врачей! Урогенитальные инфекции, обусловленные условно-патогенной биотой, у женщин.

В каких случаях проводят «Исследование биоценоза урогенитального тракта. Фемофлор 16»

• наличие субъективных и/или объективных симптомов, связанных с урогенитальным трактом, у женщин репродуктивного возраста вне беременности;
• планирование беременности;
• репродуктивные потери;
• подготовка к экстракорпоральному оплодотворению;
• планируемое оперативное вмешательство в области малого таза;
• мониторинг эффективности проведенного лечения.

Исследование предназначено для детальной оценки микробиоценоза влагалища, может быть рекомендовано для проведения комплексного клинического обследования с учетом многоочаговости инфицирования, стертой клинической симптоматики, риска осложнений. Выявляя этиологическую структуру инфекционно-воспалительного процесса, данное исследование дает возможность оптимизировать, минимизировать и индивидуализировать терапию, то есть проводить адекватное, этиологически направленное лечение каждого пациента с учетом принципа «необходимости и достаточности». См. также: Перечень видов высокотехнологичной медицинской помощи по профилю «Акушерство и гинекология» Обратите внимание на учебное пособие для врачей! Урогенитальные инфекции, обусловленные условно-патогенной биотой, у женщин.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Интерпретация результатов исследования «Исследование биоценоза урогенитального тракта Фемофлор 16»

Результаты исследования представлены в геном-эквивалентах (ГЭ); количество ГЭ пропорционально количеству клеток микроорганизма.

Абсолютные количества ГЭ выявленных в образце групп микроорганизмов приводятся в первом столбце бланка выдачи результатов. Однако для большинства микроорганизмов клиническое значение имеют не их абсолютные количества, а соотношение численности групп микроорганизмов в биоценозе влагалища. Относительные количества генетически родственных групп микроорганизмов в ОБМ представлены во втором столбце бланка в двух форматах: в виде десятичного логарифма и в процентах.

Для удобства трактовки результатов в таблице использована цветовая маркировка. В зависимости от измеряемого параметра приняты следующие обозначения:

Контроль взятия материала (КВМ) – это количество клеток эпителия человека в исследуемом образце. Достаточное для анализа количество биоматериала – 10^4 ГЭ/образец и более. Недостаточное для анализа количество биоматериала – менее 10^4 ГЭ/образец, в этом случае количественные соотношения между исследуемыми группами микроорганизмов могут отличаться от истинного соотношения этих групп в «микробной пленке».

Цветовое обозначение групп микроорганизмов на диаграмме:

Интерпретация результата всегда проводится лечащим врачом с учетом клинических проявлений и анамнеза заболевания. Результаты исследования микробиоценоза влагалища могут быть применены для женщин репродуктивного возраста. Состояние микробиоценоза влагалища в период менопаузы характеризуется иными значениями физиологической нормы.

Обратите внимание на учебное пособие для врачей! Урогенитальные инфекции, обусловленные условно-патогенной биотой, у женщин.

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.