Исследование иксодового клеща методом ПЦР на наличие возбудителей боррелиоза (болезни Лайма), вирусного клещевого энцефалита, моноцитарного эрлихиоза, гранулоцитарного анаплазмоза

Исследование иксодового клеща: показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

Показанием для выполнения исследование является присасывание клеща к телу человека.

Для Российской Федерации наибольшее эпидемиологическое значение имеют иксодовые клещи (относящиеся семейству Ixodidae).

Для инфекций, передающихся иксодовыми клещами, характерна весенне-осенняя сезонность с апреля по октябрь, однако в регионах с теплым климатом отмечается круглогодичная активность иксодовых клещей. Группами риска по заболеваемости инфекциями, передающимися иксодовыми клещами, являются жители городской и сельской местности, посещающие очаги обитания клещей. Передача возбудителей инфекций происходит при присасывании зараженных клещей к телу человека.

Изображение используется согласно лицензии Shutterstock.
К инфекциям, передающимся иксодовыми клещами, относятся клещевой вирусный энцефалит, иксодовые клещевые боррелиозы, клещевой гранулоцитарный анаплазмоз человека, моноцитарный эрлихиоз человека и другие (лихорадка Ку, крымская геморрагическая лихорадка, туляремия, риккетсиозы).

Возбудитель клещевого энцефалита - РНК-содержащий вирус рода Flavivirus. Инкубационный период заболевания составляет, как правило, 7–14 дней от момента присасывания клеща, но может длиться до 25 дней. Инфекция поражает клетки головного и спинного мозга с последующим развитием парезов и параличей.

Выявление возбудителя клещевого вирусного энцефалита в клеще позволяет своевременно провести экстренную профилактику инфекции. В случае получения положительного результата показано экстренное введение специфического иммуноглобулина - не позднее 72 часов от момента укуса. Максимальная эффективность препарата наблюдается при его введении в течение первых суток после укуса.

Возбудитель болезни Лайма - спиралевидная бактерия рода Borrelia. Заболевание развивается в 20% случаев после присасывания клеща, инфицированного боррелиями. У 50-80% больных отмечается местное кожное воспаление – клещевая мигрирующая эритема (покраснение), диаметр которой не превышает 5 см. При распространении по крови боррелии поражают внутренние органы, клетки нервной системы, в результате чего могут развиться менингит, менингоэнцефалит, радикулоневрит, неврит черепных нервов.

Изображение используется согласно лицензии Shutterstock.
Возбудитель гранулоцитарного анаплазмоза человека - бактерия Anaplasma phagocytophilum, которая поражает гранулоциты – белые клетки крови, содержащие гранулы (нейтрофилы, эозинофилы, базофилы). Заражение происходит при укусе клеща, инфицированного бактериями - анаплазмами.

Среди симптомов заболевания отмечают длительную лихорадку, слабость, головную боль, потливость, кашель, тошноту, рвоту, диарею, боль в мышцах и суставах. Увеличиваются лимфатические узлы, могут наблюдаться поражения почек, печени, селезенки. Реже диагностируется воспаление оболочек головного и спинного мозга. Инкубационный период в среднем составляет 14 дней.

Возбудителями моноцитарного эрлихиоза являются бактерии, относящиеся к роду Ehrlichia. Они попадают в организм человека со слюной клеща, по лимфатическим путям проникают в кровь и начинают размножаться в клетках внутренней поверхности сосудов, в белых клетках крови - моноцитах. После разрушения клетки микроорганизмы выходят из нее и инфицируют другие. Поражаются внутренние органы (печень, центральная нервная система, костный мозг, кожа) с развитием инфекционных гранулем. Клиническая картина эрлихиоза схожа с гранулоцитарным анаплазмозом.

Гранулоцитарный анаплазмоз человека, моноцитарный эрлихиоз и боррелиоз являются показанием к назначению антибактериальной терапии. При своевременном выявления заболевания и лечении прогноз благоприятный.

При обнаружении присосавшегося клеща для его удаления из тела необходимо обратиться в травматологический пункт. Если такой возможности нет, клеща следует удалить самостоятельно. Для этого нужно перехватить тело клеща обернутыми марлей пальцами или пинцетом строго перпендикулярно поверхности тела, как можно ближе к его ротовому аппарату. Затем, поворачивая тело клеща вокруг оси, извлечь его. Не рекомендуется смазывать место укуса и самого клеща маслом. Клеща с кусочком влажной ваты необходимо поместить в плотно закрываемую емкость (специальный контейнер с крышкой для исследования биоматериала, банку, пробирку или др.). Нельзя помещать в одну емкость клещей, снятых с разных людей.

Ранку на коже продезинфицировать антисептиком (спиртом, йодом, зеленкой), руки после извлечения клеща тщательно вымыть с мылом. Контейнер с клещом доставить в ближайший медицинский офис в день снятия. В настоящее время можно приобрести специальные устройства для удаления клеща, которые продаются в аптеке.

Изображение используется согласно лицензии Shutterstock.
Клеща (в контейнере или другой емкости) необходимо доставить в медицинский офис в день снятия.

Качественные тесты («обнаружено - не обнаружено»)  исследования клеща для выявления РНК/ДНК возбудителей инфекций, передаваемых иксодовыми клещами: клещевого энцефалита, боррелиоза (болезни Лайма), анаплазмоза, эрлихиоза выполняются до 3 рабочих дней.

Сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

Форма представления результата: тест качественный.

Метод определения - молекулярно-генетический (ПЦР). ПЦР (полимера́зная цепна́я реа́кция) - метод молекулярной биологии, позволяющий обнаружить малые концентрации генетического материала (определенных фрагментов РНК/ДНК) бактерий, вирусов, паразитов в биологическом материале (в крови, моче, соскобе, исследуемом клеще).

Анализ выполняется для ранней диагностики, экстренной специфической профилактики и проведения лечения заболеваний, передаваемых иксодовыми клещами.
Исследуемый материал - клещ.

«Не обнаружено» - не обнаружено специфических фрагментов РНК или ДНК возбудителя клещевого энцефалита или боррелиоза, анаплазмоза, эрлихиоза в теле клеща.

В данных исследованиях проводится выявление в клеще специфических фрагментов РНК или ДНК возбудителей инфекционных заболеваний, которые переносятся клещами:

• вирус клещевого энцефалита (Tick-borne encephalitis Virus, TBEV)– возбудитель клещевого энцефалита;
• боррелии (Borrelia burgdorferi s.l.) – возбудитель боррелиоза – болезни Лайма;
• анаплазмы (Anaplasma phagocytophilum) – возбудитель гранулоцитарного анаплазмоза человека;
• эрлихии (Ehrlichia chaffeensis/E.muris-FL) – возбудитель эрлихиоза. 

Ответ выдается в виде «ОБНАРУЖЕНО» или «НЕ ОБНАРУЖЕНО» по каждому из инфекционных агентов.

Интерпретация результата:

Обнаружено: выявлены специфические фрагменты РНК или ДНК соответствующего инфекционного агента в теле клеща.

Не обнаружено: не обнаружено специфических фрагментов РНК/ДНК данного возбудителя.

При присасывании клеща на эндемичной по клещевому вирусному энцефалиту территории и/или получении положительного результата лабораторного исследования клеща необходимо срочно обратиться за медицинской помощью для принятия мер экстренной профилактики в течение 72 часов после присасывания под наблюдением врача-инфекциониста, а при его отсутствии – врача-терапевта. При появлении клинических признаков заболевания следует как можно быстрее обратиться к врачу-инфекционисту в медицинскую организацию.

Если клещ не сохранился или не подлежит исследованию вследствие неправильного хранения, с целью раннего обнаружения возбудителей инфекций в организме пациента могут быть назначены следующие исследования крови:

• антитела класса IgМ к вирусу клещевого энцефалита (количественный анализ);