Резус-фактор плода. Выявление гена RHD плода в крови матери (RHD gene of the fetus in the mother's blood)

Синонимы: Определение резус-фактора плода по внеклеточной фетальной ДНК в крови резус-отрицательной матери.

RHD gene of the fetus in mother's blood; Fetal RHD genotyping of cell-free fetal DNA (cff-DNA) from RhD-negative pregnant women.

Краткое описание исследования «Резус-фактор плода. Выявление гена RHD плода в крови матери»

Внимание! Данное исследование проводится только у серологически резус-отрицательной пациентки при сроке беременности более 10 недель.

Резус (Rh) – это одна из важнейших систем эритроцитарных антигенов (наряду с системой АВ0), клинически значимая при оценке возможности возникновения резус-конфликта и риска развития гемолитической болезни плода и новорожденного.

В системе резус различают пять антигенов. Наиболее иммуногенным является антиген D, аминокислотная последовательность которого кодируется геном RHD. Присутствие антигена D на поверхности эритроцитов определяет положительный резус-фактор (Rh+). Доля резус-положительных людей-носителей антигена D в популяции составляет около 86%, а резус-отрицательных людей (Rh-), не имеющих антигена D, – около 14%.

Особенности течения беременности резус-отрицательных женщин

Течение беременности резус-положительным плодом у резус-отрицательных женщин* часто осложняется развитием гемолитической болезни плода, связанной с трансплацентарным переносом эритроцитов плода в кровоток матери. 98% случаев гемолитической болезни новорожденных связаны с D-резус-антигеном. Попадая в кровь резус-отрицательной матери, он вызывает образование специфических антител, которые проникают через плаценту и разрушают эритроциты плода. Это влечет за собой развитие гемолитической болезни плода и новорожденного. При раннем проявлении резус-конфликт может стать причиной преждевременных родов или самопроизвольного прерывания беременности. Сенсибилизация матери к D-антигену и риск развития резус-конфликта возрастают с каждой последующей беременностью резус-положительным плодом независимо от того, прервалась беременность или прошло родоразрешение.

* У беременных женщин, имеющих резус-положительную принадлежность, проблем совместимости по резус-фактору с плодом не возникает.

Лабораторная диагностика с целью своевременной диагностики резус-иммунизации при ведении беременности у резус-отрицательных женщин

При ведении беременности резус-отрицательных женщин, с целью своевременной диагностики резус-изоиммунизации рекомендовано направлять беременную с резус-отрицательной принадлежностью крови на определение антиэритроцитарных (антирезусных) антител (см. тест № 140). При резус-отрицательной принадлежности крови мужа/партнера определение антирезусных антител не проводится.

При неизвестной или резус-положительной принадлежности крови мужа/партнера беременной пациентки желательно провести неинвазивное определение резус-фактора плода по циркулирующим в крови матери внеклеточным фрагментам плодовой ДНК. Это исследование рекомендовано во время проведения первого пренатального скрининга.

Обнаружение маркеров гена RHD у плода свидетельствует о его генотипически положительном резус-факторе.

Преимущества ПЦР с детекцией в режиме реального времени

Метод, включающий исследование ДНК плода (фетальной фракции свободно циркулирующей ДНК, фетДНК) в крови матери, обладает рядом преимуществ:

• относится к неинвазивным для плода процедурам, не несет угрозы течению беременности и не вызывает осложнений;
• исследование фетДНК возможно проводить, начиная со срока 10 акушерских недель беременности;
• позволяет оценить необходимость введения иммуноглобулина при отсутствии в крови беременной антирезусных антител на сроке 20 недель.

Аналитические показатели метода

Определяемые участки ДНК: 7-й и 10-й экзоны гена RHD.

Диагностическая чувствительность: 100% (92-100%).

Диагностическая специфичность: 100% (90-100%).

Чувствительность метода составляет 150 копий геномной ДНК (суммарной ДНК матери и плода) в 1,0 мл исследуемого образца плазмы.

Ограничения метода

Чаще всего отрицательный резус-фактор обусловлен полным отсутствием гена RHD. В этом случае резус-фактор определяется как отрицательный серологическим методом и методом ПЦР, т. е. результаты исследований совпадают.

У 1% серологически резус-отрицательных женщин определяется наличие гена RHD. Это происходит в следующих случаях:

1. ген RHD присутствует, и генотипически резус-фактор будет положительным, но в результате мутаций D-антиген не синтезируется и серологическим методом определяется как отрицательный;
2. ген RHD присутствует полностью или частично, и генотипически резус-фактор будет положительным, но в результате мутаций синтезируется измененный D-антиген. Серологически это определяется или как слабый резус-фактор, или как нестабильно положительный резус-фактор.

Такие пациентки являются генотипически резус-положительными и определить резус-фактор плода методом ПЦР невозможно.

Данные относительно распределения резус-фактора и процентное соотношение наличия гена RHD у серологически резус-отрицательных женщин указаны для европеоидной расы.

Противопоказания к проведению исследования

Трансплантации органов и тканей в анамнезе у пациентки.

Срок беременности составляет менее 10 недель.

С какой целью выполняют исследование

Данное исследование, направленное на выявление гена RHD плода в крови матери методом ПЦР в режиме реального времени, позволяет определить резус-статус плода на ранних сроках беременности у резус-отрицательной пациентки для своевременного расчета риска развития резус-конфликта и проведения профилактических мероприятий.

Литература

1. Клинические рекомендации. Резус-изоиммунизация. Гемолитическая болезнь плода. МЗ РФ. – 2024.
2. Коноплянников А. Г. и др. Иммунологическая несовместимость плода и матери по резус-фактору: медицинская значимость и экономический эффект применения молекулярно-генетических технологий //Акушерство, гинекология и репродукция. – 2021. – Т. 15. – №. 5. – С. 525-533.
3. Clausen F. B., van der Schoot C. E. Noninvasive fetal blood group antigen genotyping //Blood Transfusion. – 2024. – Т. 23. – №. 2. – С. 101.

Внимание! Данное исследование проводится только у серологически резус-отрицательной пациентки при сроке беременности более 10 недель.

Правила подготовки к исследованию

Специальной подготовки не требуется.

Показания для анализа «Резус-фактор плода. Выявление гена RHD плода в крови матери»:

• ведение беременности у женщины с отрицательным резус-фактором для своевременного расчета риска развития резус-конфликта;
• отсутствие в крови беременной с отрицательным резус-фактором антител к D-антигену плода перед профилактическим введением иммуноглобулина;
• хирургическое прерывание беременности у женщины с отрицательным резус-фактором с целью прогнозирования развития резус-конфликта при последующих беременностях.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Интерпретация результатов исследования «Резус-фактор плода. Выявление гена RHD плода в крови матери»

Внимание! Данное исследование проводится только у серологически резус-отрицательной пациентки при сроке беременности более 10 недель.

Единицы измерения: нет.

Референсные значения: нет.

• Ген резус-фактора (RHD) плода не выявлен: результат интерпретируется как «Резус-фактор плода генотипически отрицательный». Развитие резус конфликта маловероятно (менее 0,1%).
• Ген резус-фактора (RHD) плода выявлен: результат интерпретируется как «Резус-фактор плода генотипически положительный». Возможно развитие резус-конфликта.
• Выявление гена резус-фактора (RHD) плода выявить невозможно: результат интерпретируется так «У матери обнаружен ген RHD. Выявить ген RHD плода данным методом невозможно». Нельзя исключить возможность развития резус-конфликта.

В тест-систему встроен КВМ* – контроль взятия материала. В случае, если значение КВМ неудовлетворительное, т. е. количество анализируемой суммарной ДНК матери и плода менее 0,1 нг в пробе. Результат интерпретируется как недостоверный и выдается ответ: «Необходимо повторно взять кровь».

В случае многоплодной беременности, результат исследования «Ген резус-фактора (RHD) плода не выявлен» интерпретируется как «Резус-фактор плода генотипически отрицательный» для всех плодов. Результат «Ген резус-фактора (RHD) плода выявлен» означает, что хотя бы один плод генотипически резус-положительный.

* КВМ – это тест по определению количества геномной ДНК человека в биоматериале, источником которой служат эпителиальные клетки, попавшие в пробу.

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.