Дифференцированное выявление ДНК Bordetella species: Bordetella pertussis (возбудитель коклюша) и Bordetella bronchiseptica (возбудитель бронхосептикоза) в соскобе эпителиальных клеток слизистой ротоглотки и/или носоглотки

Синонимы: Анализ мазка носо- и ротоглотки на возбудителей коклюша и бронхосептикоза.

Naso- and oropharyngeal swab tests for pertussis and bronchosepticosis pathogens.

Краткое описание исследования «Дифференцированное выявление ДНК Bordetella species: Bordetella pertussis (возбудитель коклюша) и Bordetella bronchiseptica (возбудитель бронхосептикоза) в соскобе эпителиальных клеток слизистой ротоглотки и/или носоглотки»

Тест включает дифференцированное определение ДНК возбудителей коклюша (Bordetella pertussis) и бронхосептикоза (Bordetella bronchiseptica) в соскобе эпителиальных клеток слизистой носоглотки и/или ротоглотки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени, а также общего гена Bordetella species, включающего Bordetella parapertussis и другие виды рода Bordetella.

Коклюш

Коклюш – это острая воздушно-капельная инфекция, вызываемая микроорганизмами вида Bordetella pertussis, характеризуемая поражением слизистой оболочки преимущественно гортани, трахеи, бронхов и развитием судорожного приступообразного кашля.

Коклюш относят к детским инфекциям, однако в возрастной структуре в последние годы преобладают подростки и взрослые, которые в большинстве случаев переносят коклюш в атипичной форме. У грудных невакцинированных детей коклюш протекает очень тяжело и представляет прямую угрозу для жизни.

Входными воротами инфекции служит слизистая оболочка респираторного тракта. Палочки коклюша проявляют строгий тропизм к клеткам мерцательного эпителия, прикрепляются к ним и размножаются на поверхности слизистой оболочки, не проникая в кровоток. Размножение обычно происходит на протяжении 2-3 недель и сопровождается выделением ряда сильных экзотоксинов, основными из них являются КТ (коклюшный токсин) и аденилатциклаза. Токсины, выделяемые Bordetella pertussis, способствуют развитию патологического процесса:

• воспалению;
• увеличению секреции слизи;
• появлению изъязвлений эпителия дыхательных путей;
• очаговому некрозу.

Коклюш относится к числу заболеваний с циклическим течением. Выделяют четыре последовательных периода:

• инкубационный, продолжительность которого составляет 3-14 дней (в среднем 7-8 дней);
• катаральный, или предсудорожный (10-13 дней);
• судорожный, или спазматический (1-1,5 недели у иммунизированных детей и до 4-6 недель у непривитых);
• период реконвалесценции (ранний – развивающийся через 2-8 недель от начала клинических проявлений и поздний – спустя 2-6 месяцев).

Заболевание продолжается минимум две недели без явлений интоксикации и повышения температуры тела, протекает с приступообразным кашлем, усиливающимся ночью и по утрам. Кашель сопровождается покраснением лица, шумными вдохами (репризами), которые заканчиваются отхождением вязкой слизи или рвотой в конце приступа.

Бронхосептикоз

Bordetella bronchiseptica – возбудитель бронхосептикоза – поражает главным образом домашних животных, а также людей, инфицирующихся при контакте с больными животными. Бронхосептикоз у людей протекает в виде ОРЗ с приступами сухого кашля, особенно перед сном.

Лабораторная диагностика коклюша и коклюшеподобных заболеваний приобретает особую значимость в связи с трудностью клинического распознавания и является важным звеном в системе противоэпидемических мероприятий.

Бактериологический метод является «золотым стандартом» лабораторной диагностики, позволяет выделить культуру возбудителя на питательной среде и идентифицировать возбудителя до вида. Но успешен он только в ранние сроки заболевания – первые две недели.

Серодиагностика (выявление противококлюшных антител) может быть применена на более поздних сроках, начиная со второй недели заболевания. При наличии типичных клинических проявлений она позволяет лишь подтвердить диагноз, в то время как при стертых и атипичных формах серодиагностика может оказаться решающей в выявлении заболевания.

Диагностическая чувствительность и специфичность: 100%.

С какой целью выполняют исследование

Тест предназначен для лабораторного подтверждения заболевания коклюшем и бронхосептикозом и дифференциальной диагностики этих заболеваний.

Что следует учесть при выполнении исследования

ПЦР является высокочувствительным, специфичным и быстрым методом, который можно использовать в разные сроки заболевания даже на фоне приема антибиотиков при выявлении атипичных и стертых форм коклюша. Наиболее информативным считается период 1-4 недели от начала заболевания. Наличие в анамнезе вакцинации против коклюша не влияет на результаты ПЦР.

Литература

1. Борисова А. Б. и др. Выявление ко-инфекции, вызванной Bordetella pertussis и Bordetella bronchiseptica //Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2024. – Т. 29. – №. 2.
2. Борисова О. Ю. и др. Анализ лабораторной диагностики коклюшной инфекции в России в 2023 году //Клиническая лабораторная диагностика. – 2024. – Т. 69. – №. 10.
3. Клинические рекомендации. Коклюш у детей. – 2019.
4. Пименова А. С. и др. Применение метода ПЦР для видовой идентификации возбудителя коклюша в Российской Федерации //Клиническая лабораторная диагностика. – 2021. – Т. 66. – №. 1. – С. 52-58..
5. Caulfield A. D., Harvill E. T. Bordetella pertussis //Molecular Medical Microbiology. – Academic Press, 2024. – С. 1463-1478.
6. Miguelena Chamorro B. et al. Bordetella bronchiseptica and Bordetella pertussis: similarities and differences in infection, immuno-modulation, and vaccine considerations //Clinical Microbiology Reviews. – 2023. – Т. 36. – №. 3. – С. e00164-22.

Правила подготовки к исследованию

Взятие материала желательно проводить до диагностических и лечебных манипуляций в предполагаемом месте локализации возбудителя.

При подготовке пациента к процедуре следует учесть:

• за 6 часов до исследования не рекомендуется использовать лекарственные средства для орошения ротоглотки и препараты для рассасывания;
• непосредственно перед взятием биологического материала не рекомендуется использовать жевательную резинку/пастилки для освежения дыхания;
• непосредственно перед взятием биоматериала прополоскать полость рта питьевой водой комнатной температуры;
• если полость носа заполнена слизью, перед процедурой рекомендуется провести высмаркивание.

Желательно соблюдать все описанные условия, если лечащим врачом не рекомендовано иное.

В каких случаях проводят анализ «Дифференцированное выявление ДНК Bordetella species: Bordetella pertussis (возбудитель коклюша) и Bordetella bronchiseptica (возбудитель бронхосептикоза) в соскобе эпителиальных клеток слизистой ротоглотки и/или носоглотки»:

• для лабораторного подтверждения заболевания коклюшем и бронхосептикозом;
• при приступообразном кашле продолжительностью более 5-7 дней у детей;
• по эпидемиологическим показаниям (людям, бывшим в контакте с больными коклюшем).

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения

Тест качественный, включает суммарный ответ по Bordetella species и отдельно по Bordetella pertussis и Bordetella bronchiseptica.

Референсные значения: нет.

Формат представления результата

Результат выдается в терминах «обнаружено» или «не обнаружено».

Трактовка результатов исследования «Дифференцированное выявление ДНК Bordetella species: Bordetella pertussis (возбудитель коклюша) и Bordetella bronchiseptica (возбудитель бронхосептикоза) в соскобе эпителиальных клеток слизистой ротоглотки и/или носоглотки»

Обнаружено

1. В анализируемом образце биологического материала обнаружены фрагменты ДНК специфичные для Bordetella species и Bordetella pertussis.
2. В анализируемом образце биологического материала обнаружены фрагменты ДНК специфичные для Bordetella species и Bordetella bronchiseptica.
3. В анализируемом образце биологического материала обнаружены фрагменты ДНК специфичные для Bordetella species.
4. Инфекция, вызванная соответствующим возбудителем.
5. Носительство возбудителя инфекции.

Не обнаружено

1. В анализируемом образце биологического материала не обнаружено фрагментов ДНК, специфичных для Bordetella species/Bordetella pertussis/Bordetella bronchiseptica.
2. Отсутствие ДНК возбудителя в исследуемом материале.
3. Уровень ДНК возбудителя в исследуемом материале ниже границы чувствительности тест-системы

Результат «не обнаружено» по видам Bordetella pertussis и Bordetella bronchiseptica, но «обнаружено» по Bordetella species свидетельствует, что в пробе присутствует ДНК других видов из рода Bordetella (исключая Bordetella pertussis и Bordetella bronchiseptica).

Определяемые виды Bordetella species

Bordetella avium, Bordetella bronchialis, Bordetella bronchiseptica, Bordetella flabilis, Bordetella hinzii, Bordetella holmesii, Bordetella muralis, Bordetella parapertussis, Bordetella pertussis, Bordetella petrii, Bordetella pseudohinzii, Bordetella sputigena, Bordetella trematum, Bordetella tumbae, Bordetella tumulicola.