Мутации лекарственной резистентности NS3, NS5A и NS5B регионов генома вируса гепатита С (для генотипов 1а, 1b)

Синонимы: Анализ крови на выявление мутаций устойчивости к препаратам для лечения гепатита С.

HCV resistance-associated substitutions (RASs).

Краткое описание исследования «Мутации лекарственной резистентности NS3, NS5A и NS5B регионов генома вируса гепатита С (для генотипов 1а, 1b)»

Тест на мутации лекарственной резистентности NS3, NS5A и NS5B регионов генома вируса гепатита С (для генотипов 1а, 1b) выявляет и идентифицирует генетические полиморфизмы неструктурных белков вируса гепатита С, которые могут влиять на эффективность применения определенных противовирусных препаратов прямого действия, используемых для лечения хронического гепатита C генотипов 1a и 1b.

Вирусный гепатит C (ВГС) – инфекционное заболевание печени, вызываемое РНК-содержащим вирусом, склонное к длительному хроническому течению с риском развития цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы.

Терапия вирусного гепатита С

Терапия этого заболевания за последние годы стала радикально эффективнее, проще, с меньшим числом побочных эффектов.

Терапией выбора при ВГС являются препараты прямого противовирусного действия (ПППД), воздействующие непосредственно на ферменты вируса, способные приводить к его полной элиминации.

ПППД делятся на три основных класса:

• ингибиторы протеазы региона NS3/4A (участвует в посттрансляционной модификации вируса);
• ингибиторы белка NS5A (компонент репликационного комплекса вируса);
• ингибиторы фермента NS5B (РНК-полимераза вируса).

Действие таких лекарственных средств приводит к остановке деления вируса и препятствует заражению новых клеток. Однако, несмотря на высокую эффективность этих препаратов, примерно у 5% больных лечение с применением ПППД оказывается неэффективным. Установлена важная роль в этом ассоциированных с лекарственной резистентностью мутаций вируса. При применении таргетированных препаратов важно понимать механизм появления таких мутаций.

Механизм появления мутаций вируса гепатита С

Одной из важных характеристик вируса гепатита С является высокая скорость репликации в сочетании с интенсивной генетической изменчивостью и коротким полупериодом жизни вириона. Ошибки транскрипции возможны при каждом цикле репликации вируса. Они приводят к изменениям структуры вирусных белков, что может по-разному влиять на их свойства. Например, случайные аминокислотные замены в структуре белков NS3, NS5A, NS5B, при которых они сохранят свои функции, но не будут эффективно ингибироваться соответствующим ПППД.

Все возможные вариации вируса с единичными заменами могут появляться многократно за 1 сутки, при исследовании резистентности рекомендуется регистрировать клинически значимые мутации, представленные в >15% популяции. Вероятность обнаружения таких мутаций выше у пациентов с ранее неуспешной терапией, чем у тех, кто еще не получал терапии. Доля резистентных вариантов в вирусной популяции возрастает по принципам естественного отбора на фоне проводимой терапии, особенно при субоптимальных дозах.

Наиболее часты мутации в регионе NS5A при генотипах вируса 1а и 3. Степень резистентности к препарату может варьировать в зависимости от позиции полиморфизма.

Чем полезно исследование?

Клиническое значение выявленной мутации резистентности соотносится:

• с определенным классом ПППД;
• с конкретным препаратом (иногда);
• с генотипом вируса;
• с клиническими характеристиками пациента (по факту предыдущего лечения, наличию цирроза);
• с планируемым режимом комбинированной терапии.

Для клинической интерпретации полученных результатов следует ориентироваться на текущие рекомендации экспертных сообществ по лечению ВГС и информацию о значимых мутациях в рекомендациях по применению соответствующего препарата. Резистентность к одному препарату может компенсироваться активностью другого при использовании лечения комбинациями ПППД разных классов или увеличением длительности лечения.

В условиях свободного доступа к разным режимам терапии, позволяющим оптимизировать лечение для людей групп повышенного риска лекарственной резистентности, проводить исследования связанных мутаций вируса обычно не требуется, но они могут быть клинически значимы при планировании режима терапии для определенных групп пациентов или ограничениях в доступности различных схем лечения.

С какой целью выполняют исследование мутаций лекарственной резистентности NS3, NS5A и NS5B регионов генома вируса гепатита С (для генотипов 1а, 1b)

Данное исследование может быть полезным при планировании лечения современными препаратами прямого противовирусного действия для пациентов с ВГС генотипов 1a, 1b, особенно в целях рационального подбора новой схемы при предшествующей неэффективной терапии ПППД или при наличии цирроза печени.

Что следует учесть при выполнении исследования

Требуется заранее определить и указать выявленный генотип вируса гепатита С (протокол регистрации результатов исследования мутаций резистентности будет зависеть от указанного генотипа). Предлагаемый вариант теста нацелен на пациентов с ВГС генотипов 1a 1b. Для пациентов с ВГС генотипа 3 см. тест № 7644G3. При других генотипах вируса исследование может быть неинформативным.

При уровне вирусной РНК в крови ниже 50 000 МЕ/мл тестирование может быть нерезультативным, поэтому следует иметь представление о текущей вирусной нагрузке (в пределах 1 месяца перед проведением теста).

Мутации, затрагивающие <15% от общей популяции вируса, не регистрируются.

Литература

1. Валутите Д. Э. и др. Выявление мутаций лекарственной устойчивости вируса гепатита С у пациентов с неэффективной терапией препаратами прямого противовирусного действия //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2021. – №. 1. – С. 18-27.
2. Клинические рекомендации. Хронический вирусный гепатит С. МЗ РФ. – 2021.
3. Bhattacharya D. et al. Hepatitis C guidance 2023 update: AASLD-IDSA recommendations for testing, managing, and treating hepatitis C virus infection //Clinical infectious diseases: an official publication of the Infectious Diseases Society of America. – 2023. – С. ciad319.
4. Pawlotsky J. M. et al. EASL recommendations on treatment of hepatitis C: final update of the series☆ //Journal of hepatology. – 2020. – Т. 73. – №. 5. – С. 1170-1218.
5. Reingardt D. E. et al. HCV drug resistance mutations in HIV-infected patients //Russian Journal of Infection and Immunity. – 2024. – Т. 14. – №. 1. – С. 86-94.
6. Sayan M. Drug Resistance to HCV in Direct-Acting Antiviral Treatments //Viral Hepatitis Journal. – 2023.
7. Информация по применению соответствующих препаратов.

Исследование проводится только пациентам с вирусным гепатитом С генотипов 1а, 1b или 3. Требуется заранее определить и указать выявленный генотип вируса гепатита С (протокол регистрации результатов исследования мутаций резистентности будет зависеть от указанного генотипа). 

При уровне вирусной РНК в крови ниже 50 000 МЕ/мл проведение исследования невозможно - следует иметь представление о текущей вирусной нагрузке*. 

*Требования указывать вирусную нагрузку при заказе – нет. 

*Текущая – т.е. проверенная недавно, желательно, в период за 1 мес до исследования. 

Взятие крови желательно проводить не ранее 4 часов после последнего приема пищи.

Показания для анализа мутаций лекарственной резистентности NS3, NS5A и NS5B регионов генома вируса гепатита С (для генотипов 1а, 1b):

• подготовка к проведению терапии гепатита С препаратами прямого противовирусного действия, в зависимости от характеристик пациента и планируемого режима терапии;
• предшествующая неудавшаяся терапия гепатита С препаратами прямого противовирусного действия и подбор новой схемы лечения;
• возникновения вторичной лекарственной резистентности в отношении ранее эффективного препарата и подбор новой схемы лечения.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: тест качественный.

Референсные значения: не обнаружено.

Формат представления результата

Результат представляют в терминах «обнаружено» или «не обнаружено» с указанием выявленной мутации/мутаций, ассоциированных с резистентностью к указанному препарату прямого противовирусного действия из числа применяющихся для лечения вирусного гепатита С соответствующего генотипа.

Обозначение мутации: цифра означает числовую позицию в структуре белка, первая буква – аминокислоту в этой позиции в референсном белке, последняя буква – аминокислоту в этой позиции в выявленном варианте замены.

Интерпретация результатов исследования на мутации лекарственной резистентности NS3, NS5A и NS5B регионов генома вируса гепатита С (для генотипов 1а, 1b)

Обнаружено

Выявлены варианты мутаций в соответствующем геномном регионе вируса, которые ассоциированы со снижением в скорости достижения устойчивого ответа на терапию указанным препаратом. Такие мутации вируса могут возникать естественным путем или возрастать в ходе применявшейся ранее противовирусной терапии и сохраняться длительное время.

Использование полученных результатов для принятия решений по ведению пациента требует внимательной интерпретации с учетом:

• генотипа вируса;
• клинического статуса пациента;
• планируемого режима терапии;
• клинических рекомендаций экспертных сообществ;
• информации производителей планируемых к применению препаратов.

Современные режимы терапии хронического гепатита С могут включать от одного до трех разных препаратов прямого действия, в которых повышенная резистентность к одному препарату может компенсироваться активностью другого или удлинением срока лечения. Полученные результаты теста не могут использоваться в качестве единственного фактора при принятии терапевтических решений.

Не обнаружено

Клинические значимые мутации вируса гепатита С, ассоциированные с резистентностью к терапии указанным препаратом, не обнаружены. Могут быть не указаны варианты, доля которых составляет менее 15% в общей популяции вируса.