Боррелии, антитела класса IgM методом Вестерн-блота (anti-Borrelia IgM, Western blot)

Синонимы: Анализ крови на возбудителя боррелиоза; Антитела IgМ к боррелиям.

Serum for borreliosis pathoборgen; IgМ antibodies to Borrelia burgdorferi.

Краткое описание исследования «Боррелии, антитела класса IgM методом Вестерн-блота»

Исследование IgM антител к боррелиям методом Вестерн-блота позволяет дать раздельный ответ по наличию IgM антител к девяти различным специфичным антигенам боррелий, что в сомнительных случаях служит полезным дополнением к ИФА-методу определения антител класса М (см. тест № 244), служащих ранним маркером инфекции.

Боррелиоз (болезнь Лайма)

Бактерии, относящиеся к совокупности видов Borrelia burgdorferi sensu lato, являются возбудителями болезни Лайма (боррелиоза) у человека. Это заболевание относится к числу наиболее распространенных в России природно-очаговых инфекций с трансмиссивным путем передачи. Известно более десяти видов Borrelia burgdorferi sensu lato, в том числе девять, строго связанных с Евразией (B. afzelii, B. garinii, B. japonica, B. lusitaniae, B. spielmanii, B. sinica, B. tanukii, B. turdi и B. valaisiana), три вида ассоциируется только с США (B. andersonii, B. californiensis и B. carolinensis).

Возбудитель Borrelia burgdorferi попадает в организм человека с укусом инфицированного клеща. Инкубационный период заболевания после инфицирования составляет 1-2 недели. В течение болезни Лайма выделяют стадии ранней (локальной и диссеминированной) и поздней инфекции. В месте проникновения возбудителя появляется мигрирующая эритема (иногда это единственное проявление ранней стадии), которая держится около месяца. У 20-45% больных возможна безэритемная форма заболевания. Далее у 10-15% пациентов при диссеминации развиваются признаки поражения:

• нервной системы (менингит, менингополирадикулоневрит, периферический паралич лицевого нерва);
• сердечно-сосудистой системы;
• опорно-двигательного аппарата (у 60% пациентов).

Поздняя стадия формируется на протяжении первых двух лет от начала заболевания, клинически характеризуется общей слабостью, поражением суставов и нервной системы. Патогномоничным поражением кожи является хронический атрофический акродерматит.

Диагностика ранних стадий Лайм-борреллиоза основана преимущественно на характерных клинических признаках (мигрирующая эритема). Однако у 20-45% больных возможна безэритемная форма заболевания. Диагностика в таких ситуациях по клиническим признакам практически невозможна. Серологические методы исследования часто помогают поставить правильный диагноз, хотя информативность серологического тестирования боррелиоза, к сожалению, ограничена.

Определение антител класса IgM методом ИФА при серологической диагностике боррелиозной инфекции часто дает неясные результаты. У части пациентов отмечают длительное персистирование IgM антител, которые таким образом не всегда отражают свежую инфекцию. На поздней стадии боррелиоза положительный результат исследования IgM не дает дополнительной информации. Распространенность антител к боррелиям в нормальной популяции зависит от региона и у людей, работающих в лесной зоне, может составлять до 40%. Антитела класса IgM иногда могут быть обнаружены спустя годы после возникновения инфекции или после лечения антибиотиками. Причина ложноположительных результатов часто остается невыясненной. В то же время отрицательный результат по IgM не исключает наличия свежей инфекции, у части пациентов с текущей инфекцией отмечают серонегативность (отрицательный результат при исследовании специфических IgM и/или IgG). Нередки случаи расхождения результатов тестирования антител к Borrelia burgdorferi тест-системами разных производителей, что зависит от специфичности используемых антигенов и чувствительности систем.

Таким образом, в диагностике боррелиоза часто возникает потребность в дополнительном серологическом исследовании, которое может дать более подробную информацию при неясной клинической картине или вызывающих сомнение результатах исследования IgM и IgG методом ИФА.

Исследование IgM антител к боррелиям методом Вестерн-блота позволяет дать развернутый ответ по наличию антител к девяти разным антигенам боррелий, включая специфичный антиген OspC p25, являющийся маркером свежей инфекции. Обнаружение IgM антител против специфичных антигенов боррелий при отсутствии антител к OspC не считается достаточным указанием на недавно возникшую инфекцию. Для установления диагноза свежей боррелиозной инфекции полученный положительный результат по IgM антителам следует подтвердить через 3-6 недель положительным результатом по антителам класса IgG на свежевзятом образце крови. Источник антигенов в данном тесте – белки из экстракта специально подобранного штамма Borrelia afzelii и рекомбинантный антиген VisE.

Специфичность антигенов:

Распространенность положительного результата исследования антител класса IgM к боррелиям методом Вестерн-блота у клинически охарактеризованных пациентов c боррелиозом и здоровых доноров крови:

С какой целью выполняют исследование

Тест используют как дополнительный для подтверждения результатов ИФА методов серологической диагностики боррелиоза, при подозрении на иксодовый клещевой боррелиоз, болезнь Лайма и ассоциированные патологические состояния.

Что следует учесть при выполнении исследования

Возможно расхождение результатов тестирования антител к Borrelia burgdorferi тест-системами разных производителей, что зависит от специфичности используемых антигенов и чувствительности систем.

Литература

1. Белов Б. С., Ананьева Л. П. Болезнь Лайма: современные подходы к профилактике, диагностике и лечению (по материалам международных рекомендаций 2020 г.) //Научно-практическая ревматология. – 2021. – Т. 59. – №. 5. – С. 547-554.
2. Богданова Т. В., Рюмин А. М., Соболевская О. Л. Диагностика хронического Лайм-боррелиоза, протекающего с поражением нервной системы //Журнал инфектологии. – 2024. – Т. 16. – №. 3. – С. 17-23.
3. Самойлов К. В. и др. Особенности иммунного ответа в ранний период иксодовых клещевых боррелиозов //Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2023. – Т. 28. – №. 5. – С. 319-330.
4. Grąźlewska W., Holec-Gąsior L. Antibody cross-reactivity in serodiagnosis of lyme disease //Antibodies. – 2023. – Т. 12. – №. 4. – С. 63.
5. Markowicz M. et al. Persistent anti-Borrelia IgM antibodies without Lyme borreliosis in the clinical and immunological context //Microbiology Spectrum. – 2021. – Т. 9. – №. 3. – С. e01020-21.
6. Sloupenska K. et al. Antigenicity and immunogenicity of different morphological forms of Borrelia burgdorferi sensu lato spirochetes //Scientific Reports. – 2024. – Т. 14. – №. 1. – С. 4014.

Правила подготовки к исследованию

Специальной подготовки не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее, чем через 4 часа после последнего приема пищи.

В каких случаях проводят анализ «Боррелии, антитела класса IgM методом Вестерн-блота»:

• в дополнение и подтверждение результатов ИФА методов серологической диагностики боррелиоза (см. тесты №№ 243, 244);
• при подозрении на иксодовый клещевой боррелиоз (болезнь Лайма);
• ассоциированные патологические состояния: хроническая мигрирующая эритема, доброкачественный кожный лимфаденоз, атрофический хронический акродерматит, артрит, кардит, нейроборрелиоз.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: нет.

Референсные значения: отрицательно.

Формат представления результата

Качественный (описание наличия/отсутствия полос, характеризующих выявление антител к каждому из указанных антигенов «положительно» или «отрицательно»; общее заключение о результате исследования в форме: «положительный»/«отрицательный»/«неопределенный»).

При общей оценке результата учитывают положение окрашенных полос (специфичность антигена) и интенсивность их окрашивания (поскольку иногда возможна неспецифическая слабая ложная реакция с отдельными антигенами).

Трактовка результатов исследования «Боррелии, антитела класса IgM методом Вестерн-блота»

Положительный

Антитела класса IgM обнаружены. Обнаружение IgM антител против различных специфичных антигенов боррелий при отсутствии антител к OspC не считается достаточным указанием на недавно возникшую инфекцию. Для установления диагноза свежей боррелиозной инфекции полученный положительный результат по IgM антителам следует подтвердить через 3-6 недель положительным результатом по антителам класса IgG на свежевзятом образце крови.

Отрицательный.

Антитела класса IgM не обнаружены. Отрицательный результат по IgM не исключает полностью вероятности наличия свежей инфекции. При имеющихся клинических подозрениях на клещевой боррелиоз целесообразно повторить исследование на специфические IgM и IgG антитела через 3-4 недели.

Неопределенный

По полученным результатам исследования (слабая полоса антигена OspC, отсутствие других положительных полос по специфичным антигенам) нельзя дать определенное заключение о наличии IgM антител к боррелиям. При имеющихся клинических подозрениях на клещевой боррелиоз целесообразно повторить исследование через 3-4 недели.